目錄:上海乾思生物科技有限公司>>細(xì)胞>>原代細(xì)胞>> 人肺巨細(xì)胞癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞株
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細(xì)胞來(lái)源:源自人肺巨細(xì)胞癌組織,經(jīng)體外傳代培養(yǎng)、低轉(zhuǎn)移能力特異性篩選及克隆化純化,經(jīng)實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證(Transwell轉(zhuǎn)移實(shí)驗(yàn)、裸鼠移植實(shí)驗(yàn))確認(rèn)其低轉(zhuǎn)移潛能,確保細(xì)胞維持肺巨細(xì)胞癌核心特征及低轉(zhuǎn)移表型。
形態(tài)特征:呈多形性,以巨細(xì)胞樣形態(tài)為主,貼壁生長(zhǎng),細(xì)胞體積較大,胞質(zhì)豐富,細(xì)胞核大且形態(tài)不規(guī)則,部分可見(jiàn)多核,顯微鏡下可見(jiàn)清晰的細(xì)胞輪廓,無(wú)雜細(xì)胞污染,生長(zhǎng)狀態(tài)穩(wěn)定,增殖速率適中(低于高轉(zhuǎn)移肺巨細(xì)胞癌細(xì)胞株)。
功能特性:具備穩(wěn)定的增殖能力和低轉(zhuǎn)移表型,體外侵襲、遷移能力顯著低于高轉(zhuǎn)移肺巨細(xì)胞癌細(xì)胞株,MMP-2、MMP-9等促轉(zhuǎn)移因子表達(dá)水平較低,E-鈣粘蛋白等抑轉(zhuǎn)移因子表達(dá)相對(duì)較高,可模擬人低轉(zhuǎn)移型肺巨細(xì)胞癌的正常生理代謝、生長(zhǎng)規(guī)律及低轉(zhuǎn)移特性,長(zhǎng)期傳代不發(fā)生明顯的轉(zhuǎn)移表型改變,符合相關(guān)實(shí)驗(yàn)與研發(fā)需求,可用于轉(zhuǎn)移調(diào)控機(jī)制研究。
純度與活性:細(xì)胞純度≥95%,活率≥90%,經(jīng)專用細(xì)胞消化液處理后可穩(wěn)定傳代,傳代3-5代內(nèi)細(xì)胞形態(tài)、活性及低轉(zhuǎn)移表型保持穩(wěn)定,無(wú)明顯衰老或表型異常,可維持典型的該細(xì)胞株特征。
無(wú)菌檢測(cè):經(jīng)支原體、細(xì)菌、真菌檢測(cè)均為陰性,無(wú)外源污染物,可直接用于實(shí)驗(yàn)培養(yǎng),保障實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。
高純度:采用專用細(xì)胞消化液結(jié)合低轉(zhuǎn)移能力篩選技術(shù),有效去除雜細(xì)胞、高轉(zhuǎn)移細(xì)胞及正常肺組織細(xì)胞,確保細(xì)胞純度,減少雜細(xì)胞對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的干擾,尤其保證低轉(zhuǎn)移表型的穩(wěn)定性。
低轉(zhuǎn)移表型穩(wěn)定:優(yōu)化的體外培養(yǎng)體系,全程嚴(yán)格控制溫度、濕度及營(yíng)養(yǎng)條件,最da程度保留細(xì)胞的低轉(zhuǎn)移潛能,細(xì)胞侵襲、遷移能力穩(wěn)定,批次間差異小,長(zhǎng)期傳代可穩(wěn)定維持低轉(zhuǎn)移特性,適配腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)實(shí)驗(yàn)。
操作便捷:提供完整的細(xì)胞培養(yǎng)說(shuō)明書(shū),配套專用肺癌細(xì)胞培養(yǎng)基,細(xì)胞復(fù)蘇后可直接接種培養(yǎng),無(wú)需復(fù)雜的預(yù)處理步驟,貼壁培養(yǎng)方式適配常規(guī)實(shí)驗(yàn)室條件,節(jié)省實(shí)驗(yàn)時(shí)間。
適用性廣:可用于人肺巨細(xì)胞癌發(fā)病機(jī)制研究、低轉(zhuǎn)移腫瘤特性探究、腫瘤轉(zhuǎn)移調(diào)控機(jī)制研究(如PI3K/Akt信號(hào)通路、MMPs家族調(diào)控等)、抗腫瘤藥物篩選與毒性評(píng)價(jià)、腫瘤轉(zhuǎn)移相關(guān)指標(biāo)檢測(cè)、免疫分析實(shí)驗(yàn)及相關(guān)診斷試劑研發(fā)等多種實(shí)驗(yàn)場(chǎng)景,兼容常規(guī)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)操作(如Western Blot、免疫熒光、Transwell侵襲/遷移實(shí)驗(yàn)、ELISA等)。
穩(wěn)定性強(qiáng):嚴(yán)格的質(zhì)量控制體系,每批次細(xì)胞均進(jìn)行活性、純度、無(wú)菌性及轉(zhuǎn)移表型檢測(cè),批內(nèi)、批間差異小,重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致性良好,有效降低實(shí)驗(yàn)誤差,適配長(zhǎng)期培養(yǎng)及各類科研實(shí)驗(yàn)需求。
細(xì)胞凍存狀態(tài):置于-80℃冰箱短期儲(chǔ)存(1-3個(gè)月),長(zhǎng)期儲(chǔ)存(超過(guò)3個(gè)月)需轉(zhuǎn)移至液氮(-196℃)中,避免反復(fù)凍融,防止細(xì)胞活性喪失、低轉(zhuǎn)移表型異常,肺巨細(xì)胞癌細(xì)胞對(duì)凍融敏感,需嚴(yán)格遵循儲(chǔ)存規(guī)范。
復(fù)蘇后細(xì)胞:復(fù)蘇后的細(xì)胞需立即接種至含預(yù)熱專用培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶,置于37℃、5% CO?培養(yǎng)箱中貼壁培養(yǎng),避免長(zhǎng)時(shí)間放置在室溫或低溫環(huán)境,影響細(xì)胞貼壁與活性,防止低轉(zhuǎn)移表型改變。
配套培養(yǎng)基:專用肺癌細(xì)胞培養(yǎng)基需置于2-8℃冷藏避光儲(chǔ)存,嚴(yán)禁冷凍,開(kāi)封后建議在1個(gè)月內(nèi)使用完畢,使用前需置于室溫平衡30分鐘,避免溫度差異影響細(xì)胞生長(zhǎng)及低轉(zhuǎn)移表型穩(wěn)定性。
細(xì)胞復(fù)蘇:將凍存管從液氮或-80℃冰箱中取出,立即放入37℃水浴鍋中快速解凍(1-2分鐘),解凍后迅速用無(wú)菌吸管轉(zhuǎn)移至含預(yù)熱培養(yǎng)基的離心管中,離心(350 g,5分鐘)后棄上清,重懸細(xì)胞后接種至培養(yǎng)瓶,全程無(wú)菌操作,動(dòng)作輕柔,避免污染與細(xì)胞損傷,肺巨細(xì)胞癌細(xì)胞較為脆弱,需減少機(jī)械損傷,防止表型異常。
細(xì)胞培養(yǎng):培養(yǎng)環(huán)境需嚴(yán)格控制為37℃、5% CO?,濕度保持在95%以上;采用貼壁培養(yǎng)方式,培養(yǎng)基更換頻率為每2-3天1次,可根據(jù)細(xì)胞密度適當(dāng)調(diào)整;傳代比例建議為1:2-1:3,傳代時(shí)采用專用細(xì)胞消化液處理,消化時(shí)間控制在3-5分鐘,避免消化過(guò)度損傷細(xì)胞,消化后需用專用終止液終止消化反應(yīng),確保細(xì)胞活性及低轉(zhuǎn)移表型穩(wěn)定。
樣本處理:若用于轉(zhuǎn)移相關(guān)檢測(cè)、蛋白提取或藥物作用實(shí)驗(yàn),細(xì)胞收集后需全程低溫處理(4℃),避免高溫導(dǎo)致蛋白降解、活性喪失,確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確性;細(xì)胞裂解液需按照說(shuō)明書(shū)步驟配制,避免雜質(zhì)干擾檢測(cè)結(jié)果,尤其注意保護(hù)促/抗轉(zhuǎn)移相關(guān)蛋白的活性。
無(wú)菌操作:全程嚴(yán)格遵循無(wú)菌實(shí)驗(yàn)規(guī)范,實(shí)驗(yàn)器具需提前滅菌,操作過(guò)程中避免手接觸細(xì)胞及培養(yǎng)基,防止細(xì)菌、支原體污染;若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基渾濁、細(xì)胞形態(tài)異常(如漂浮、變形、貼壁不良),需立即丟棄,避免污染擴(kuò)散,肺巨細(xì)胞癌細(xì)胞抗污染能力較弱,需加強(qiáng)無(wú)菌管控。
表型維持:培養(yǎng)過(guò)程中可定期通過(guò)Transwell侵襲/遷移實(shí)驗(yàn)、Western Blot等方法檢測(cè)細(xì)胞轉(zhuǎn)移能力及相關(guān)分子(如MMP-2、MMP-9、E-鈣粘蛋白等)表達(dá)水平,確保細(xì)胞維持低轉(zhuǎn)移表型;若出現(xiàn)轉(zhuǎn)移能力增強(qiáng)等表型異常,需及時(shí)調(diào)整培養(yǎng)條件或更換新鮮培養(yǎng)基。
細(xì)胞凍存:凍存細(xì)胞時(shí),需使用專用凍存液(含10% DMSO+40%培養(yǎng)基+50%胎牛血清),緩慢降溫(4℃ 30分鐘→-20℃ 1小時(shí)→-80℃過(guò)夜→液氮長(zhǎng)期儲(chǔ)存),避免降溫過(guò)快導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)冰晶形成,損傷細(xì)胞結(jié)構(gòu),提升復(fù)蘇成活率及后續(xù)低轉(zhuǎn)移表型穩(wěn)定性。
本產(chǎn)品僅用于科研用途,不用于臨床診斷、治療等醫(yī)學(xué)用途;實(shí)驗(yàn)廢棄物(含細(xì)胞的培養(yǎng)基、離心液、細(xì)胞裂解液等)需按照生物安全規(guī)范妥善處理,避免環(huán)境污染。
產(chǎn)品有效期詳見(jiàn)外包裝盒,超過(guò)有效期的細(xì)胞嚴(yán)禁使用;使用過(guò)程中若出現(xiàn)細(xì)胞活性下降、表型異常、污染等情況,可聯(lián)系技術(shù)支持獲取解決方案。
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