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小鼠避暗儀的實驗方法及注意事項
小鼠避暗儀的實驗方法
實驗準(zhǔn)備
熟悉環(huán)境：實驗前2天使小鼠熟悉實驗室環(huán)境，自由飲食、攝水。
分組設(shè)計：按分層隨機區(qū)組設(shè)計，使各組動物平均體重和性別比例相似。實驗小鼠按訓(xùn)練方法不同分為單次適應(yīng)單次電擊（MOS）、單次適應(yīng)限時訓(xùn)練（MOL）、多次適應(yīng)限時訓(xùn)練（MUL）3組，每組根據(jù)給藥不同分為對照（C）和模型（M）兩個亞組，最后共6組（每組n=9）。
儀器設(shè)置：避暗儀分為明、暗兩室，其間有一直徑為3cm的圓洞，兩室底部均鋪以銅柵。暗室底部銅柵可通電，電壓通過按鈕調(diào)節(jié)，一般為40V，50Hz。
訓(xùn)練方法
MOS法：訓(xùn)練在一天內(nèi)完成，先將小鼠放入避暗儀中適應(yīng)環(huán)境3min，訓(xùn)練時將小鼠背對洞口放入明室內(nèi)，其進(jìn)入暗室受到電擊即取出。
MOL法：訓(xùn)練在一天內(nèi)完成，小鼠適應(yīng)環(huán)境3min，訓(xùn)練3min。
MUL法：連續(xù)3天在同一時間將小鼠放入避暗儀中適應(yīng)3min，第三天適應(yīng)完成后開始訓(xùn)練，3min后取出。適應(yīng)環(huán)境和訓(xùn)練時任小鼠在明室和暗室之間自由穿梭，步入潛伏期大于3min者棄去不用。
測試方法
記錄指標(biāo)：訓(xùn)練完成24h后將小鼠再次放入明室，記錄其第一次進(jìn)入暗室所需的時間，即步入潛伏期（STL）和5min內(nèi)進(jìn)入暗室的次數(shù)，即錯誤次數(shù)（ETs）。若5min內(nèi)小鼠未進(jìn)入暗室則STL記為300s，ETs記為0。
注意事項
實驗環(huán)境
環(huán)境清理：實驗前后注意清理點擊柵欄動物排泄物，排泄物會影響通電性。通過酒精擦拭、晾干盡可能去除上一只動物氣味，儀器設(shè)備需具備通風(fēng)系統(tǒng)。
減少干擾：在實驗過程中必須保持所有實驗程序一致，如屏蔽噪音、減少氣味刺激、調(diào)節(jié)光線等，實驗環(huán)境應(yīng)該安靜、昏暗，盡量輕巧抓取動物，減少對動物的刺激。關(guān)閉兩箱中間的門時要輕柔，不要制造過多外界的聲響影響動物行為。
實驗操作
動物適應(yīng)：實驗開始前3-7天，每天抓取、輕撫動物，讓其適應(yīng)被實驗人員抓取，避免實驗過程中因?qū)嶒炄藛T抓取而造成動物處于應(yīng)激狀態(tài)，造成實驗結(jié)果不可靠的問題。
電擊參數(shù)：大鼠電流為0.65-1.8mA（推薦0.8mA），或電壓65-70V；小鼠電流為0.15-0.6mA（推薦0.25mA），或電壓30-36V，頻率為5-15Hz電流。
設(shè)備維護(hù)：實驗儀器底部的銅柵容易生銹，導(dǎo)致電阻增加，每次實驗前，應(yīng)以砂紙打磨光滑。