黃曲霉毒素B1檢測卡使用說明書

　　一、產(chǎn)品簡介

　　黃曲霉毒素B1（Aflatoxin B1,AFB1）是已知致癌性很強的化學(xué)物質(zhì)之一，主要污染糧油及其制品（如花生、玉米、小麥、大米、茶葉、食用油等）。黃曲霉毒素B1檢測卡采用膠體金免疫層析技術(shù)，通過特異性抗體抗原反應(yīng)快速定性檢測樣本中的AFB1殘留，適用于企業(yè)自檢及監(jiān)管機構(gòu)初篩。

　　二、檢測范圍與靈敏度

　　適用樣本：谷物、飼料、食用油、醬油、醋、發(fā)酵酒等。

　　靈敏度：

　　谷物/飼料類：3-10ppb（μg/kg）；

　　油脂類：5ppb（μg/kg）。

　　檢測下限：符合中國及歐盟標(biāo)準(zhǔn)（如玉米/花生中AFB1允許量≤20μg/kg，歐盟進(jìn)口花生原料≤8μg/kg）。

　　三、檢測原理

　　樣本中的AFB1與膠體金標(biāo)記的特異性抗體結(jié)合，競爭性抑制抗體與檢測卡上AFB1-BSA偶聯(lián)物的結(jié)合。若樣本中AFB1含量≥檢測限，檢測線（T線）不顯色，結(jié)果為陽性；若<檢測限，T線顯色，結(jié)果為陰性。

　　四、操作步驟

　　1.樣本前處理

　　谷物/飼料：

　　取代表性樣品5g以上，粉碎過20目篩，稱取0.5-2.0g至離心管。

　　加入4mL純凈水+4mL乙酸乙酯（或70%甲醇水），振蕩5分鐘，4000rpm離心1分鐘。

　　取上清液2mL至蒸發(fā)皿，吹干后用0.3-2mL稀釋液復(fù)溶，混勻備用。

　　食用油：

　　取0.5-2.0g油樣，加入8mL正己烷+4mL純凈水，振蕩3分鐘，吸去上層正己烷。

　　加入4mL乙酸乙酯，振蕩5分鐘，離心后取2mL上清液吹干，用稀釋液復(fù)溶。

　　液體樣本（醬油、醋等）：

　　取25g樣品，加入20mL振搖3分鐘，靜置分層后取下層液體。

　　過濾后吹干，用稀釋液溶解殘留物。

　　2.點卡檢測

　　從鋁箔袋中取出檢測卡，平放于桌面，1小時內(nèi)使用。

　　用滴管吸取處理后的樣本液，緩慢滴加3滴（約80μL）至加樣孔（S孔）。

　　室溫靜置8-10分鐘，讀取結(jié)果（超過12分鐘判讀無效）。

　　五、結(jié)果判讀

　　陰性（-）：T線（檢測線）與C線（對照線）均顯色，且T線顏色≥C線。

　　陽性（+）：僅C線顯色，T線不顯色或顏色很淺。

　　無效：C線未顯色，可能因操作不當(dāng)或檢測卡失效，需重新檢測。

　　六、注意事項

　　樣本處理：

　　避免交叉污染，使用一次性吸頭；油脂樣本需去除上層油層后取下層液體。

　　若提取液偏酸/堿，需調(diào)節(jié)pH至中性后再檢測。

　　操作規(guī)范：

　　檢測卡避免陽光直射或電風(fēng)扇直吹；加樣時滴管垂直懸空，防止氣泡產(chǎn)生。

　　讀取結(jié)果時，檢測卡保持水平，勿移動或觸摸中央膜面。

　　安全與儲存：

　　黃曲霉毒素B1為劇毒物質(zhì)，操作時佩戴手套，廢棄物按危險品處理。

　　檢測卡需在4-30℃干燥避光保存，有效期12-18個月（具體見包裝）。

　　局限性：

　　本產(chǎn)品為初篩工具，陽性結(jié)果需用HPLC或LC-MS/MS進(jìn)一步確認(rèn)。

　　僅適用于清亮、無混濁顆粒的樣本溶液，否則可能阻塞膜孔導(dǎo)致顯色異常。

　　七、配置清單

　　標(biāo)配：檢測卡、滴管、干燥劑、說明書。

　　需自備：天平（感量0.1g）、離心機、粉碎機、蒸發(fā)皿、移液器、乙酸乙酯、正己烷等。

　　八、示例場景

　　企業(yè)自檢：某花生油廠每批次取2g油樣，按前處理步驟操作后，15分鐘內(nèi)完成檢測，陽性樣本立即隔離復(fù)檢。

　　監(jiān)管抽檢：市場監(jiān)管部門使用本卡快速篩查市售大米，發(fā)現(xiàn)T線不顯色時，封存樣品并送實驗室定量分析。