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中檢維康iELisa嘔吐毒素檢測(cè)ELISA試劑盒概要
嘔吐毒素也稱(chēng)為脫氧雪腐鐮刀菌烯醇(DON)，是由串珠鐮刀菌、輪狀鐮刀菌以及多育鐮刀菌等產(chǎn)生的真菌毒素，大多存在于糧谷、飼料及其制品中。中毒后影響消化系統(tǒng)和神經(jīng)系統(tǒng)，主要表現(xiàn)為嘔吐、頭痛、頭暈、腹痛、腹瀉等癥狀。我國(guó)標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定：玉米、大麥、小麥及其制品中嘔吐毒素不得超過(guò)1mg/kg，豬、犢牛、泌乳期動(dòng)物配合飼料中嘔吐毒素不得超過(guò)1mg/kg，牛、家禽配合飼料中嘔吐毒素不得超過(guò)5mg/kg。
原理
測(cè)定的基礎(chǔ)是抗原-抗體反應(yīng)。微孔板上包被有抗抗體。加入嘔吐毒素(DON)標(biāo)準(zhǔn)品或樣品、酶標(biāo)抗原和抗體后，游離的嘔吐毒素與酶標(biāo)抗原競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合抗體，抗體或抗體結(jié)合物與固定在微孔板上的抗抗體再結(jié)合，沒(méi)有結(jié)合的標(biāo)準(zhǔn)品、酶標(biāo)抗原及抗體被洗去，加入TMB底物顯藍(lán)色，加入終止液后顏色由藍(lán)變黃，用酶標(biāo)儀在450nm處檢測(cè)，吸光值與樣品中嘔吐毒素含量成負(fù)相關(guān)，與標(biāo)準(zhǔn)曲線比較即可得出嘔吐毒素的含量。
注意事項(xiàng)
室溫低于20℃或試劑及樣品未回到室溫(20- 25℃)會(huì)導(dǎo)致數(shù)值偏低。
在洗板過(guò)程中如果出現(xiàn)板孔干燥過(guò)久的情況，則會(huì)出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)曲線不成線性，重復(fù)性不好的現(xiàn)象。所以洗板排干后應(yīng)立即進(jìn)行下一步操作。
標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)和顯色液對(duì)光敏感，避免直接暴露在光線下。
混合要均勻，洗板要*(包括加樣品和標(biāo)準(zhǔn)液的時(shí)候都必需充分混合均勻)。
終止液為強(qiáng)酸性物質(zhì)，避免接觸皮膚。
不要使用過(guò)了有效期的試劑盒，也不要混合使用不同批次的試劑盒，這樣會(huì)引起測(cè)定結(jié)果不準(zhǔn)確。
試劑盒的儲(chǔ)存條件是2-8℃，切勿冷凍。