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高效液相色譜(HPLC)的原理與正反模式
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高效液相色譜(HPLC)是什么?
高效液相色譜(HPLC)是分析化學(xué)領(lǐng)域中的一項核心技術(shù)。常規(guī)的HPLC分析廣泛應(yīng)用于藥物研發(fā)、質(zhì)量控制(QC)與質(zhì)量保證(QA),以及食品和環(huán)境檢測等多個領(lǐng)域的實驗室中。此外,也存在一些專門化的液相色譜技術(shù),如制備型HPLC、凝膠滲透色譜(GPC)以及超高效液相色譜(UHPLC)。實際應(yīng)用中具體選擇何種技術(shù),取決于待測樣品的性質(zhì)與需要分析的含量。
高效液相色譜(HPLC)的分離過程包括將少量液體樣品注入填充有細(xì)小顆粒固定相(通常粒徑為3–5μm)的HPLC色譜柱中。通過高壓泵輸送的流動相推動樣品中各組分在色譜柱內(nèi)遷移,實現(xiàn)高效分離。在質(zhì)量控制(QC)與質(zhì)量保證(QA)實驗室的常規(guī)分析中,所使用的液相流動相典型流速范圍為1–2mL/min。
高效液相色譜(HPLC)的分離原理
高效液相色譜(HPLC)的分離原理主要基于樣品分子與色譜柱中填料顆粒之間發(fā)生的多種化學(xué)作用與物理吸附。這些相互作用直接決定了HPLC色譜柱的選擇性。目前存在種類豐富的HPLC色譜柱和填料類型,以適應(yīng)日益拓展的應(yīng)用需求。借助化學(xué)鍵合相所具有的不同選擇性,可實現(xiàn)測試樣品中各組分的有效分離。在此基礎(chǔ)上,當(dāng)這些被分離的組分隨流動相離開色譜柱后,會由HPLC檢測器進(jìn)行定性與定量檢測。
高效液相色譜(HPLC)的正相和反相模式
在高效液相色譜(HPLC)中,分離機(jī)制基于分子極性的差異。根據(jù)“相似相溶”原理,極性相近的分子間更容易發(fā)生吸附或相互作用;反之,極性差異大的分子間作用力較弱,甚至可能出現(xiàn)排斥。
在正相色譜(NP-HPLC)模式下,固定相為極性填料,流動相為非極性溶劑。此時,非極性物質(zhì)因與固定相作用較弱而洗脫較早,極性物質(zhì)則因較強(qiáng)保留而洗脫時間較長。
而在反相色譜(RP-HPLC)——目前HPLC分析中最常用的分離模式中,固定相為非極性,流動相為極性溶劑。極性物質(zhì)與固定相相互作用弱,因此優(yōu)先被洗脫;而非極性組分由于在固定相上有更強(qiáng)的保留,其在色譜柱中的保留時間顯著延長。
高效液相色譜(HPLC)系統(tǒng)的產(chǎn)品推薦
安捷倫1260InfinityIII多方法系統(tǒng)是一款面向特定應(yīng)用的高效液相色譜(HPLC)系統(tǒng),能夠?qū)崿F(xiàn)極高的系統(tǒng)利用率和最小化人工干預(yù)。該系統(tǒng)支持多用戶在單一平臺上訪問并運(yùn)行各自的個性化分析方法。該系統(tǒng)可存儲不同科學(xué)家的多種日常HPLC方法,并自動切換執(zhí)行個性化方法,無需手動更換色譜柱或溶劑。以下是安捷倫1260InfinityIII多方法系統(tǒng)的產(chǎn)品特性與性能指標(biāo)。
產(chǎn)品核心特性:
全自動多方法運(yùn)行:系統(tǒng)可自動在最多4根色譜柱和15種溶劑之間切換,實現(xiàn)無人值守操作,極大延長了儀器有效運(yùn)行時間。
多用戶平臺:支持多位用戶在同一系統(tǒng)上并行運(yùn)行各自專屬的日常分析方法,提高了設(shè)備共享性和利用率。
高壓兼容與靈活混合:可在高達(dá)800bar壓力下運(yùn)行方法,并利用BlendAssist軟件動態(tài)混合儲備液,實現(xiàn)方法靈活性與高性能的統(tǒng)一。
綠色可持續(xù):該系列產(chǎn)品已獲得MyGreenLabACT環(huán)保標(biāo)簽,確認(rèn)其在產(chǎn)品生命周期內(nèi)對環(huán)境的影響更低。
關(guān)鍵性能指標(biāo):
系統(tǒng)壓力操作范圍:最高達(dá)800bar
流速范圍:0.2-10mL/min(視泵型號而定)
進(jìn)樣體積:0.1–100µL(標(biāo)準(zhǔn));0.1–1500µL(選配MultiDraw套件)
溶劑通道:最多可支持15種溶劑(需外接溶劑選擇閥)
色譜柱容量:4根
泵類型:可選二元泵、四元泵或全能泵
適用場景
安捷倫1260InfinityIII多方法系統(tǒng)非常適用于制藥、化工、食品等需要進(jìn)行頻繁方法切換和質(zhì)量控制(QC)的實驗室,是提升多項目研究效率的理想選擇。
關(guān)于安捷倫科技
安捷倫科技有限公司是分析與臨床實驗室技術(shù)領(lǐng)域的全球領(lǐng)導(dǎo)者,致力于為提升人類生活品質(zhì)提供敏銳洞察和創(chuàng)新經(jīng)驗。安捷倫的儀器、軟件、服務(wù)、解決方案和專家能夠為客戶最具挑戰(zhàn)性的難題提供更可靠的答案。



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