Microlute PLR 血漿和血清中磷脂的去除方案
Microlute TM PLR 血漿和血清中磷脂的去除方案 (實(shí)驗(yàn)方案)
使用 Microlute™ PLR 96 孔板或小柱,高效且可重復(fù)地去除血漿和血清樣品中的磷脂。
1. 加樣(Load)
向每個孔中加入 50–200 μL 的血漿或血清樣品。
2. 蛋白質(zhì)沉淀
向孔中加入 樣品體積 3–4 倍的沉淀溶劑,以沉淀蛋白質(zhì)。
★ 推薦溶劑:1% 甲酸 / 乙腈
★ 可替代溶劑:1% 甲酸 / 甲醇
3. 混合(Mix)
在洗脫前,將兩種溶液充分混合以確保蛋白質(zhì)沉淀。
★ 選項(xiàng) 1 – 吸液混勻(推薦):
使用手動移液器、自動移液器或自動加液系統(tǒng)上下吸打 3–4 次。
★ 選項(xiàng) 2 – 渦旋混勻:
建議使用高速混合,以獲得最佳均勻蛋白沉淀,同時避免飛濺或孔間交叉污染。
4. 洗脫(Elute)
與傳統(tǒng)的填充型產(chǎn)品不同,Microlute™ PLR 無需高真空或高壓力即可高效、均勻地洗脫樣品。
★ 真空洗脫:
施加低于-0.1 bar 的真空,持續(xù) 3 分鐘,或直至樣品洗脫。
★ 正壓洗脫:
施加低于3 PSI 的壓力,持續(xù) 3 分鐘,或直至樣品洗脫。
★ 注意:如果磷脂去除或純化效果不夠理想,可降低真空或壓力,以減緩流速。
★ 警告:使用較高的真空或壓力可能導(dǎo)致磷脂去除效率下降,并增加其他基質(zhì)組分(如蛋白質(zhì))穿透到樣品中的風(fēng)險。
5. 分析(Analyse)
★ 可直接將洗脫液進(jìn)樣至液相色譜系統(tǒng) LC;
★ 或者在進(jìn)樣前進(jìn)行稀釋;
★ 或者將洗脫液蒸干,再重溶于更適合分析的溶劑后進(jìn)樣。
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