如何從小鼠肺組織這一結(jié)構(gòu)復雜、細胞脆性高的器官中，高效、穩(wěn)定地制備出高活性、高得率的單細胞懸液？傳統(tǒng)的人工研磨聯(lián)合酶消化方案，常因操作不一致、力度不均導致細胞活性驟降，且批次間差異顯著，已成為制約下游單細胞測序等高精度研究的技術(shù)瓶頸。而借助上海凈信單細胞懸液制備儀的標準化流程操作，能夠?qū)崿F(xiàn)對小鼠肺組織的溫和解離，顯著提升懸液質(zhì)量與實驗效率，為后續(xù)實驗提供堅實可靠的細胞起點。

　　實驗材料：健康小鼠一只、解剖工具一套、單細胞懸液制備儀一臺、消化液1瓶、終止液1瓶、1XPBS 1瓶 、70um濾網(wǎng)1個、離心機1臺；流式細胞儀用于活率檢測

　　實驗目的：通過單細胞懸液制備儀的標準化操作，實現(xiàn)小鼠肺組織的高效解離，獲得無明顯組織碎片、細胞粘連少的單細胞懸液，同時較大限度地保留細胞活性(目標活率≥95%)，為后續(xù)流式細胞分析、單細胞測序、細胞功能檢測等實驗提供合格樣本，解決傳統(tǒng)手動制備方法中 “細胞活率低、純度差、重復性弱” 的痛點。

　　小鼠肺組織細胞懸液制備的實驗步驟：

　　1、選取健康小鼠1只，斷頸處死，打開腹腔，取出肺器官

　　2、用1XPBS洗滌肺器官

　　3、選取28.5mg肺組織，用眼科剪剪成糊狀

　　4、放入加滿消化液的離心管中

　　5、放入單細胞懸液制備儀的管架上，管架預熱5分鐘

　　6、選擇模塊4進行實驗，實驗結(jié)束后儀器自動停止

　　7、用70um濾網(wǎng)過濾，加入終止液終止消化(消化液：終止液1：2)

　　8、放到離心機上重懸

　　9、重懸后棄掉上清，加入少量PBS打散混勻底部沉淀細胞

　　10、吸取200ul單細胞懸液，加入PI避光染色10分鐘

　　11、后續(xù)進行流式分析，細胞活率為98.67%

　　實驗效果：

　　單細胞懸液制備儀對小鼠肺組織制備的實驗結(jié)果分析：活率98.67%

　　實驗操作注意事項：

　　1. 機器使用時應保證位置放置平穩(wěn)

　　2. 機器適于短時、間歇工作，請勿長時間連續(xù)使用,工作時間建議不超過 8 小時。

　　3. 為保護機器內(nèi)部的電路和機械，禁止用流水沖洗，而只能用濕布擦拭。

　　4. 使用過程中如有任何異常，應立即斷電，交由專業(yè)人員處理。

　　5. 機器必須放置在平整的實驗臺上(如果是石質(zhì)臺面更好)，以防設備工作時振動。

　　6. 一定要時刻保持警惕狀態(tài)，請一切檢查好之后再開啟動!

　　從實驗結(jié)果來看，借助單細胞懸液制備儀的精準控溫與標準化消化模塊，最終獲得的小鼠肺組織單細胞懸液活率高達 98.67%，遠超手動制備(通?；盥?80%-90%)，且懸液中無明顯組織碎片，滿足流式分析對樣本純度與活性的嚴苛要求。這一實驗結(jié)果印證了單細胞懸液制備儀在動物組織單細胞處理中的核心價值 —— 它不僅通過管架預熱、專屬模塊設置簡化了操作流程，還避免了人為操作差異導致的實驗誤差，讓肺組織單細胞懸液制備從 “依賴經(jīng)驗” 轉(zhuǎn)向 “標準化可控”。

　　無論是基礎科研中的細胞表型分析，還是臨床前研究中的肺臟疾病機制探索，單細胞懸液制備儀都能為高質(zhì)量樣本制備提供穩(wěn)定支持，成為提升實驗效率與數(shù)據(jù)可靠性的關(guān)鍵工具。