熒光顯微成像系統(tǒng)BZ 系列中很受客戶喜愛的圖像拼接、光學(xué)切片、Z棧功能

諾伯特·蓋特曼博士

杜塞爾多夫大學(xué)醫(yī)院
大學(xué)癌癥中心（University Cancer Center、UTZ） 專務(wù)理事
血液內(nèi)科、腫瘤科、臨床免疫科 高級(jí)醫(yī)師

杜塞爾多夫大學(xué)癌癥中心（University Cancer Center、UTZ） 專務(wù)理事。主要以被稱為MDS（骨髓異常增生綜合征）的白血病前期病癥為中心研究惡性骨髓疾病。另外，基于MDS的特定形態(tài)中發(fā)現(xiàn)有核紅細(xì)胞（成熟的紅血球前體細(xì)胞）的線粒體中存在明顯的鐵過剩現(xiàn)象，對(duì)鐵代謝相關(guān)的特定問題也具有研究興趣。

杜塞爾多夫大學(xué)醫(yī)院具有30年以上的MDS研究歷史。擁有大量MDS注冊病歷的該大學(xué)醫(yī)院，將長期對(duì)疾病的經(jīng)過進(jìn)行詳細(xì)記錄作為重點(diǎn)，在這類疾病的病理學(xué)、診斷、風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估中已成為重要的研究基礎(chǔ)。蓋特曼博士等長年收集大量的骨髓及血液樣本，并將其保管在MDS病歷的生物材料數(shù)據(jù)庫中。并通過數(shù)據(jù)庫內(nèi)信息，在分子生物學(xué)層面上進(jìn)行分析。

■骨髓鉆孔活組織檢查或三維細(xì)胞培養(yǎng)的組織微陣列，在顯微鏡觀察中是特別困難的課題

MDS作業(yè)團(tuán)隊(duì)由碩士課程的學(xué)生2名、研究醫(yī)生1名、BTA（生物學(xué)技術(shù)助理）1名組成。

蓋特曼博士說道“試用熒光顯微成像系統(tǒng)BZ 系列后，被其超高的性價(jià)比，以及豐富的模塊帶來的可擴(kuò)展性所折服。像我們這樣的小規(guī)模作業(yè)團(tuán)隊(duì)也可從財(cái)團(tuán)獲得資金而得以購買，而表示衷心感謝。相信可逐步擴(kuò)充新的模塊"。

團(tuán)隊(duì)中負(fù)責(zé)對(duì)3種血液腫瘤進(jìn)行細(xì)胞級(jí)別研究的成員，已將正置熒光顯微成像系統(tǒng)作為標(biāo)準(zhǔn)器械使用，成功實(shí)施了使用最多7個(gè)熒光染料的Opal多重IHC實(shí)驗(yàn)。但是，該顯微鏡無法滿足他們的各種需求，這是導(dǎo)入熒光顯微成像系統(tǒng)BZ 系列的原因之一。

該團(tuán)隊(duì)獨(dú)立開發(fā)出MDS骨髓鉆孔活檢查TMA（組織微陣列）。該TMA包括AML（急性骨髓性白血?。┗颊叩慕M織和正常對(duì)照組的組織進(jìn)行對(duì)比。評(píng)價(jià)TMA相關(guān)免疫組織化學(xué)研究時(shí)，熒光顯微成像系統(tǒng)BZ 系列的一大優(yōu)點(diǎn)在于，可將TMA上的一個(gè)樣本或多個(gè)樣本匯總至1張圖像。

蓋特曼博士說道“要在1張圖像中顯示2  mm的核，圖像拼接功能尤其重要"。

圖像拼接功能對(duì)骨髓前體細(xì)胞的in vitro培養(yǎng)評(píng)價(jià)也有效。例如，準(zhǔn)備以有核紅細(xì)胞的線粒體為目標(biāo)結(jié)構(gòu)進(jìn)行研究時(shí)，熒光顯微成像系統(tǒng)BZ 系列的一大優(yōu)點(diǎn)當(dāng)然是倒置的光路，由此能夠輕松進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的定位與評(píng)價(jià)。另外西蒙·布里爾（BTA）補(bǔ)充說道?！斑@個(gè)顯微鏡和軟件可以讓觀察更加直觀。使用分析軟件，可通過各種方法輕松地快速處理圖像"

■1. 鐵粒幼細(xì)胞性貧血的病理

鐵粒幼細(xì)胞性貧血是指，在紅血球生成前體細(xì)胞的線粒體中過度蓄積大量鐵的特殊MDS。該疾病從1950年代開始被人知曉，但其機(jī)制仍不明確。若干年前發(fā)現(xiàn)75至80％的鐵失利用性貧血患者存在SF3B1基因的剪接體變異。就是說，線粒體吸收鐵后，被稱為亞鐵螯合酶的酶無法將鐵高效吸入原卟啉，導(dǎo)致鐵大量蓄積在線粒體基質(zhì)。最終導(dǎo)致血紅素合成驟減。如果沒有血紅素，細(xì)胞就會(huì)發(fā)出“鐵不足"的信號(hào)，導(dǎo)致線粒體中的鐵過剩進(jìn)一步加劇。過剩的鐵使線粒體發(fā)生氧化、損傷。

?加深對(duì)線粒體膜的相互作用的理解

為了探究鐵與卟啉無法順利結(jié)合的原因，蓋特曼博士正在研究線粒體內(nèi)膜或基質(zhì)的蛋白質(zhì)相互作用。使用熒光顯微成像系統(tǒng)BZ 系列，通過PLA（鄰位連接技術(shù)）將蛋白質(zhì)間相互作用可視化為熒光信號(hào)，檢查膜復(fù)合體中是否有構(gòu)造異常。另外使用光學(xué)切片功能，還可獲得無熒光模糊的清晰圖像。僅抽取來自各對(duì)焦平面的信號(hào)，可創(chuàng)建全幅對(duì)焦圖像。作為研究對(duì)象的蛋白質(zhì)相互作用中，有亞鐵螯合酶與“線粒體血紅素代謝復(fù)合體"的相互作用參與，其中一部分是過渡性物質(zhì)。

研究醫(yī)生法蒂梅·馬蒂迪回憶道，“訪問波恩的作業(yè)團(tuán)隊(duì)時(shí)，偶然看到了BZ 系列的展示。立刻被這個(gè)小型裝置所具有的各種功能所折服"。

■2. 三維細(xì)胞培養(yǎng)中骨髓異常增生綜合征的病理

蓋特曼博士及其團(tuán)隊(duì)，為了確認(rèn)骨髓前體細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)，目前已在研究室確立了三維細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。以往只能進(jìn)行普通的二維集落分析實(shí)驗(yàn)。三維培養(yǎng)是造血前體細(xì)胞在半固體培養(yǎng)基中形成集落，并在該狀態(tài)下進(jìn)行研究的方法。但是，三維細(xì)胞培養(yǎng)對(duì)顯微鏡的要求更高，由此熒光顯微成像系統(tǒng)BZ 系列的Z棧功能及圖像拼接功能、光學(xué)切片功能得以發(fā)揮真正價(jià)值。這些功能成為導(dǎo)入熒光顯微成像系統(tǒng)BZ 系列的決定因素。蓋特曼博士等針對(duì)三維細(xì)胞培養(yǎng)的免疫組織化學(xué)及核染色、DNA-RNA混合構(gòu)造的檢測等用途，正在開發(fā)新的可視化方法。

■3. 醫(yī)藥品開發(fā)：NEDD化抑制劑

對(duì)于還未充分驗(yàn)證效果的NEDD化抑制劑，當(dāng)前正在進(jìn)行臨床試驗(yàn)。蓋特曼博士的團(tuán)隊(duì)正在研究該新藥對(duì)造血前體細(xì)胞及其分化產(chǎn)生哪些影響。其中EGFR（表皮生長因子受體）的PLA（鄰位連接技術(shù)）檢測細(xì)胞表面的受體同源二聚化，其結(jié)果是在細(xì)胞內(nèi)部發(fā)生受體的磷酸化反應(yīng)，從而充當(dāng)細(xì)胞增殖時(shí)的信號(hào)的效果。在進(jìn)行采訪時(shí)，由于初期結(jié)果還沒有發(fā)表，因此無法提供更準(zhǔn)確的信息。

對(duì)于蓋特曼博士的作業(yè)團(tuán)隊(duì)來說，熒光顯微成像系統(tǒng)BZ 系列的導(dǎo)入是重大的進(jìn)步。在杜塞爾多夫大學(xué)內(nèi)的過渡項(xiàng)目中其他研究人員也將使用BZ 系列。

基恩士 一體化熒光顯微成像系統(tǒng) BZ-X1000系列，

在醫(yī)學(xué)與生命科學(xué)等領(lǐng)域應(yīng)用廣泛。

如果想了解更多信息可留言或電話咨詢，我們將竭誠為您服務(wù)。