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產(chǎn)品名稱：人免疫循環(huán)復(fù)合物C1q(CIC-C1q)ELISA試劑盒

產(chǎn)品性狀：盒狀液體

產(chǎn)品規(guī)格：96T/盒：zui多可以檢測90個(gè)樣本；48T/盒：zui多可以檢測42個(gè)樣本

保存條件：試劑盒2-8℃保存，樣本-80℃保存。運(yùn)輸采用干冰或冰袋

技術(shù)要求：請嚴(yán)格按照說明書操作步驟進(jìn)行檢測，操作規(guī)范、儀器設(shè)備齊全

1人免疫循環(huán)復(fù)合物C1q(CIC-C1q)ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟

使用前將所有試劑置于室溫平衡30分鐘左右，也可置于37℃溫箱快速回溫至室溫。

注意：酶標(biāo)板未恢復(fù)室溫前，請勿開封。

1	每孔加入校準(zhǔn)品/待測樣品50μL，之后每孔再加入一抗抗體50uL。
2	蓋上封板膜，在37℃下孵育60分鐘，或者室溫置于微孔板振蕩器*上震蕩60分鐘。
3	洗板5次，最后一次洗板后棄去殘留洗液，倒扣酶標(biāo)板，在干凈的吸水紙上拍干。
4	每孔加入100μL酶標(biāo)二抗工作液。
5	蓋上封板膜，在37℃下孵育30分鐘，或者室溫置于微孔板振蕩器*上震蕩60分鐘。
6	洗板5次，最后一次洗板后棄去殘留洗液，倒扣酶標(biāo)板，在干凈的吸水紙上拍干。
7	每孔加入100μL顯色液
8	37℃下避光孵育15**分鐘。
9	每孔加入50μL終止液。
10	使用酶標(biāo)儀在450nm檢測波長及620~690nm參比波長條件下測定吸光度值，如果沒有參比波長則僅選擇450nm波長進(jìn)行檢測。如果最高濃度校準(zhǔn)品OD值過高，應(yīng)立即在405/630nm雙波長條件下檢測。

2.樣品采集、預(yù)處理及儲存

下面列出的樣品收集和儲存條件旨在作為一般性指導(dǎo)，不同類型樣品的儲存、使用穩(wěn)定性尚未評估。

· 血清：使用血清采集管采集全血，室溫靜置待血細(xì)胞凝集后取的血清，或直接在1000×g下離心15分鐘取得血清。操作應(yīng)柔和，避免溶血發(fā)生。獲取的血清應(yīng)及時(shí)進(jìn)行檢測，如不能及時(shí)進(jìn)行檢測，應(yīng)等分為多份，儲存在-20℃及以下溫度條件，儲存時(shí)間不超過6個(gè)月，冷凍儲存血清樣品凍融不超過2次。血清樣品建議2倍以上稀釋，例如：50μL樣品+50μL的1×通用稀釋液，稀釋后的血清樣本可在2~8℃儲存不超過8小時(shí)。建議選取1~2份樣本進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)確定最佳稀釋度。

血漿：使用EDTA或肝素采血guan收集血漿。全血采集后以1000×g離心15分鐘取得血漿。操作應(yīng)柔和，避免溶血發(fā)生。獲取的血漿應(yīng)及時(shí)進(jìn)行檢測，如不能及時(shí)進(jìn)行檢測，應(yīng)等分為多份，儲存在-20℃及以下溫度條件，儲存時(shí)間不超過6個(gè)月，冷凍儲存血漿樣品凍融不超過2次。血漿樣品建議2倍以上稀釋，例如：50μL樣品+50μL的1×通用稀釋液，稀釋后的血清樣本可在2~8℃儲存不超過8小時(shí)。建議取1~2份樣本進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)確定最佳稀釋度。

· 結(jié)果計(jì)算

建議使用以下方式進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)曲線的擬合：

l 四參數(shù)邏輯（4-P）曲線擬合：以濃度值為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)；

建議使用專業(yè)化軟件進(jìn)行結(jié)果擬合和計(jì)算，如ELISACALC、SPSS、Graphpad Prism等。示例數(shù)據(jù)

以下數(shù)據(jù)和曲線僅供參考，實(shí)驗(yàn)者需根據(jù)自己的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)建立標(biāo)準(zhǔn)曲線。

1. 注意事項(xiàng)

· 試劑盒內(nèi)所有成分僅供研究使用！

· 終止液含稀硫酸，具有腐蝕性，應(yīng)謹(jǐn)慎操作。

· 試劑盒成分含防腐劑、蛋白成分等，可能引起皮膚過敏反應(yīng)，應(yīng)佩帶口罩避免吸入薄霧。

· 顯色劑、濃縮洗液可能引起皮膚、眼睛和呼吸道刺激，應(yīng)佩帶口罩避免吸入薄霧。

· 佩戴防護(hù)手套、眼睛和面部防護(hù)用品，實(shí)驗(yàn)操作后洗手。

2. 技術(shù)要點(diǎn)

· 不同批次的試劑盒不能混用，不建議將不同板上的微孔板條組裝在一塊板上檢測，盡管是同一批次試劑，也可能存在板與板之間的差異。

· 每次實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)當(dāng)始終配制標(biāo)準(zhǔn)曲線平行檢測，不能將上一次的標(biāo)準(zhǔn)曲線用于下一次實(shí)驗(yàn)結(jié)果的計(jì)算。

· 不要使用超過有效期的試劑盒進(jìn)行檢測。

· 底物顯色劑應(yīng)當(dāng)為無色，如變藍(lán)表明已變質(zhì)，不能應(yīng)用于實(shí)驗(yàn)。

· 使用適當(dāng)?shù)姆獍迥っ芊馕⒖装鍡l，以便檢測結(jié)果更加可靠。

· 操作時(shí)盡量避免產(chǎn)生氣泡。不要將不同試劑瓶的瓶蓋交叉使用。

· 應(yīng)當(dāng)遵循說明書的操作進(jìn)行實(shí)驗(yàn)，不按照說明書的操作將導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果的變化，任何不遵循說明書的實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)當(dāng)事先詢問售后技術(shù)支持的建議。否則我們不保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠。