賽默飛色譜及質(zhì)譜
【藥典】生物藥-SCX-MS 用于復(fù)雜糖基化修飾蛋白的分子量分析
檢測(cè)樣品：糖基化修飾蛋白
檢測(cè)項(xiàng)目：分子量
方案概述：本文使用強(qiáng)陽離子交換（SCX）實(shí)現(xiàn)蛋白異構(gòu)體的分離，同時(shí)結(jié)合 SCX 的pH 洗脫后 native mass 檢測(cè)的優(yōu)勢(shì) [7]，使得蛋白信號(hào)移向高質(zhì)量端的優(yōu)勢(shì)，實(shí)現(xiàn)較為復(fù)雜糖蛋白的分子量直接檢測(cè)。
幾乎所有真核表達(dá)的蛋白都或多或少的包含了糖修飾。從廣義 上來說糖修飾可以分為 3 種類型，一，由高爾基體在蛋白 的表達(dá)的過程中修飾導(dǎo)致，例如絕大多數(shù)的單抗（不是所有的 單抗都糖基化）、雙抗、多抗、融合蛋白、部分重組蛋白等。 這一類修飾通常稱為糖基化 [1]。二，通過一系列理化技術(shù)， 在特定氨基酸殘基或基團(tuán)上人為修飾的糖，例如多糖蛋白結(jié)合 疫苗 [2]。這一類修飾沒有特定名稱。三，在生物藥發(fā)酵過程 中，通過氨基酸殘基上的氨基與溶液中過剩的葡萄糖醛基發(fā)生 反應(yīng)，從而實(shí)現(xiàn)的糖修飾 [3]。這一類修飾通常稱為糖化。
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